生物科技模板

外显子组（exomes）是基因组中全部外显子的总和。以人类基因组为例，共计约 18 万个外显子，仅占基因组总量的 1%，碱基规模约 30Mbp。针对全部外显子区域开展测序的技术，即为全外显子组测序，简称 WES。人类外显子组占基因组比例不足 2%，却囊括了约 85% 的疾病相关变异，因此在编码区基因变异研究中，该技术相较全基因组测序，具备更高的经济性与检测效率。

技术原理

WES基于目标捕获测序（Targeted Capture Sequencing）原理。首先通过超声打断或酶切将基因组DNA片段化，然后利用与所有已知外显子区域互补的生物素标记探针（Bait/Probe）与片段化DNA进行液相杂交，特异性地"钓取"外显子片段；随后通过磁珠分离捕获的目标片段，经过PCR扩增和文库构建后，在高通量测序平台上进行双端测序（Paired-End），最终通过生物信息学分析识别SNV（单核苷酸变异）、Indel（插入缺失）、CNV（拷贝数变异）等变异类型。

技术优势

1. 高性价比：相比全基因组测序（WGS），WES仅测序1%的基因组，数据量小、成本低，通常价格仅为WGS的1/5-1/10
2. 高深度覆盖：可将测序深度提升至100X-200X甚至更高，有效提升低频突变和杂合突变的检测灵敏度
3. 聚焦功能区域：直接针对编码区，避免非编码区大量未知变异的干扰，临床解读更明确
4. 检测全面：可同步检测SNV、Indel及部分CNV，覆盖已知约20,000个基因的外显子区域
5. 数据存储友好：单样本原始数据约10-20GB，远低于WGS的90GB+，便于大规模存储和传输

应用领域

关键质控节点：

DNA完整性、文库片段分布、捕获效率（中靶率>60%）、覆盖均一性、测序深度（有效深度>100X）、碱基质量（Q30>85%）。